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DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細胞的基礎(chǔ)上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應(yīng),zui后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復(fù)合物,此復(fù)合物在高鹽（0.7mol/...

體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：1、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)...

固相萃取柱用于HPLC，GC，LC-MS/MS，GC-MS或其他技術(shù)分析樣品的制備。廣泛應(yīng)用在藥物代謝及動力學(xué)、藥物分析、生物檢測、毒品和興奮劑檢測、食品安全分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域。固相萃取柱應(yīng)用的科學(xué)原理很簡單：一是讓待檢測的化合物通過固相萃取柱，而讓雜質(zhì)保留在固相萃取柱上，應(yīng)用廣泛的實例包括C18，PSA，NH2固相萃取柱于農(nóng)殘分析；另一種策略就是讓雜質(zhì)穿過固相萃取柱，固相萃取柱有選擇性地濃縮和保留待檢測的化合物。固相萃取就是一種“開、關(guān)”原理，待檢測化合物要么*保留再洗脫...

熒光定量PCR因操作方便、運行速度快、實驗結(jié)果準確，受到越來越多的分子生物學(xué)研究者青睞。在實驗技術(shù)成熟的今天，也許對你來說，zui難得不是實驗技術(shù)上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預(yù)算，更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對各種不同性能的產(chǎn)品，您又該如何選擇呢？認識熒光定量PCR的兩個誤區(qū)：誤區(qū)一：儀器通道越多越好隨著PCR技術(shù)的成熟運用，多重擴增越來越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。從zu...

原理：抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng)，一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇（Antigenicdeterminant），另一方面取決于機體的免疫狀態(tài)，當(dāng)具備以上兩個條件后，抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)?？乖姆N類繁多，包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫動物具有不同的特...

經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后，無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細胞培養(yǎng)的要求，但對有些實驗卻不適合，如觀察一種生長因子對某種細胞的作用，這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子；又如需要...